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熒光濾光片選擇注意事項
日期:2025-12-21 10:13
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摘要:熒光濾光片選擇注意事項
熒光濾光片選擇注意事項
在分析領域,熒光濾光片可用于生物化學活性的實時觀察、定性鑒別、定量分析。熒光光譜技術以其靈敏度高、特異性好、操作簡便等優點,在生物和分析領域得到了廣泛的應用。大部分熒光儀器,包括大部分熒光顯微鏡,通常都是熒光濾光片式的。一個典型的系統由三個濾波器組成:勵磁濾波器(勵磁)、雙色分束器(分光)和輻射濾波器(輻射).激發濾波器,通常是帶寬濾波器,用來通過熒光吸收光譜。二色光束鏡是一種邊緣濾波器,通常以 45 ° 的角度組裝,用于反射激發光和傳輸輻射光,發射濾光片,通常是帶寬濾光片,只有輻射光才能通過濾光片濾除其他光譜,包括激發光。
當被測樣品具有多熒光光譜時,窄帶濾波器是優選方案,窄帶濾光片只允許*強的輻射熒光光譜,降低了自發熒光噪聲和相互作用效應,從而提高了系統的信噪比。
熒光濾光片應用領域
流式細胞儀、熒光顯微鏡、多通道實時熒光定量PCR、DNA分析儀、血細胞分析儀、血紅蛋白分析儀等生化、定量熒光檢測組織和細胞中的氮,細胞膜分析、**和分子診斷儀器、單分子結構分析、熒光活性細胞成像、微結構和單分子成像、細胞膜上單蛋白動力學、鈣離子檢測、**追蹤、細胞結構成像。
如何選擇熒光濾光片
選擇熒光濾光片的原則是盡可能讓熒光即發射光通過成像端,同時*大程度阻擋激發光,從而獲得*佳的信噪比。特別是在全內反射和多光子顯微鏡應用中,輕微的噪聲干擾成像的效果,因此對信噪比控制相當嚴格。通常當我們看濾光片的參數時,我們通常看透射光譜,但是熒光強度相對于激發光來說是很弱的。根據截止深度來選擇濾波器更為必要。在選擇激發濾波片和發射濾波片時,截止深度的OD值是一個重要的判據。一般要求交點的0d值大于5,激光激發大于0d6,才能獲得較好的熒光信噪比。



